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Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前,先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5%脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时,确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1%Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印迹)抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔,回收托盘algn青浦区Merck细胞分析仪Merck仪器咨询问价上海益启生物的细胞跨膜电阻仪询价联系方式。

白的免疫检测:SNAP i.d.“ 2.0系统与SNAP 1.d.系统(首先代)与标准免疫检测一种。 SNAPi.d。 2.0蛋白质检测b。快照蛋白质检测。标准系统Midi印迹系统首先代,单孔免疫检测对照,茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液(10-0.63 ug)被转移到Immobilon9-P膜上。印迹被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的盐水中制备含0. 1%Tweene 20表面活性剂(TBST),并用主要抗B-Tubulin探测(MAB3408)和次级HRP偶联的山羊蚂蚁(AP1 24P)在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。图2. erbB2的免疫检测:SNAP i.d.9 2.0系统与SNAP i.d.系统(首先代)与标准免疫检测s。 S
15分钟。图4.扩展孵化(过夜):SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5%NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒,标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,对于HRP偶联的二抗山羊抗兔(AP132P),将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后,将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化(1小时):,SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免上海益启生物的样本制备仪询价公司电话。

有关详细信息,请参见表2。●不建议在SNAP i.d. @ 2.0系统中剥离印迹。印迹已被剥离可以从阻塞步骤开始在SNAP i.d.o 2.0系统中对遵循标准协议的系统进行重新探测。●如果不需要剥离(例如,如果使用其他二抗进行检测),则可以重新检测印迹快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系统中使用。 优化准则抗体已经开发了优化指南,以使用户能够转换所用抗体的浓度将标准免疫检测测定法浓缩至适用于SNAP i.d. @ 2.0系统的浓度。大多数用户会能够使用相同量的抗体,但与标准品相比,体积更小,浓度更高免疫检测。但是,当使用扩展抗体方案(第12页)时,可以使用相同的方法通常用于标准免疫检测的一抗的浓度,体积和时间,其次是较高浓度的二抗,持续时间较短。表1.如何根据SNAP i.d.9上海益启生物细胞计数器的销售电话。青浦区Merck细胞分析仪Merck仪器咨询问价
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